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  磁性纳米粒子固定化的脂肪酶高效萃取药食两用植物中的降脂成分 发布时间:2019-06-11 【打印】 【关闭】

  

  建立了磁珠-脂肪酶的配体垂钓结合HPLC-MS开发的新方法,具有发展为重要战略性技术与产品的潜力。我们首次用羧基修饰的磁性纳米粒子为担体,将胰脂肪酶固定于其表面。通过对比该固定化酶和自由酶的催化活性、热力学稳定性、储存稳定性、重复使用能力等,证实胰脂肪酶经过该法共价固定于磁性纳米粒子后,酶催化活性、储藏时间和稳定性都得到了显著性的提高,是磁性配体垂钓的理想材料。固定化酶的KmVmax分别为0.02 mM, 6.40 U/mg enzyme,远远好于自由酶的0.29 mM3.16 U/mg enzyme 

  以其对两种药食两用植物(荷叶)和乌龙茶的活性物质进行分析,快速灵敏地得到了6个活性成分(荷叶里的quercetin-3-O-β-D-arabinopyranosyl-(12)- β-D-galactopyranoside quercetin-3-O-β-D-glucuronide,乌龙茶里的EGCG,GCGECG);进一步地,配合活性测试、荧光淬灭、分子对接等方法,验证了配体垂钓所得物质的酶抑制活性,探讨了配体与脂肪酶的相互作用机理。该项工作为天然食品、药用植物等得活性物质阐明建立了一套完整的方法。该系列工作发表于Materials Science and Engineering C (IF 5.1), Food Chemistry(Top 期刊)Journal of Agricultural and Food Chemistry(Top 期刊)上。 

    

 
 
  Fig. 1. TEM images of the bare Fe3O4 MNPs (left) and amino-functionalised MNPs (right). 

     

 
 
   

  Fig. 2. AFM images of (A) Fe3O4SiO2NH2COOH and (B) MNPs-PPL. The vertical scale is 10 nm while the horizontal scales are both 1 μm. 

    

   

    

  Fig.3. Scheme for the MSPE and analysis of the active compounds fished out 

    

   

  Fig. 4. The UPLC-UV chromatograms of oolong tea extract and the 50% ACN eluent from PL-MNPs after extraction. 

    

    

   

  Figure 5. Superimposition of the top-scoring docking positions of (A) Qc-3-O-AraGal and (B) Qc-3-O-Glu in PPL active sites 

    

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